Chondrex Western blot封闭缓冲液(ChonBlock)

Chondrex Western blot封闭缓冲液(ChonBlock)

背景简介：

传统的Western blot封闭缓冲液（如含BSA、酪蛋白及NGS的配方）提供了一种经济有效的方法来提升Western blot检测的信噪比。尽管许多商品化封闭缓冲液成本较高，但其封闭效果优于传统配方。ChonBlock作为一种新型Western blot封闭缓冲液，其性能与其他商品化产品相当，性价比高。

产品性能对比：

1.ChonBlock与竞品Western blot封闭缓冲液的性能对比

 M:分子量Marker  CB: ChonBlock封闭液  A:竞品A  B：竞品B  C.竞品C

   1(条带)：HMGB1   2(条带)：降解的HMGB1

   样本：纯化后的HMGB1细胞裂解液

   一抗：HMGB1抗体（cat#7032）

   二抗：goat anti-mouse IgG HRP (1:5000 dilution)

2.ChonBlock与传统Western blot封闭缓冲液的性能对比

L:SP2/O细胞裂解液  P:纯化后的HMGB1(Cat#9050)  M:分子量Marker

1(条带)：HMGB1   2(条带)：降解的HMGB1   BSA: 牛血清白蛋白  CRB:考马斯亮蓝

CB: ChonBlock封闭液 COMP:同竞品牌WB封闭液

采用15%聚丙烯酰胺凝胶在还原条件下进行Western blot实验，以比较三种不同缓冲液体系的性能。实验使用小鼠抗HMGB1单克隆抗体（货号#7032）作为一抗（工作浓度1μg/ml），并以HRP标记的山羊抗小鼠IgG抗体作为二抗（稀释比例1:4000）。

结果显示：

1)BSA-Tween缓冲液组因缺乏封闭效果，出现非特异性条带拖尾现象；

2)竞品缓冲液虽能防止非特异性拖尾，但目标信号较弱且背景显色较深；

3)使用ChonBlock缓冲液的实验组则观察到清晰的HMGB1特异性条带，且背景信号极低。

3.ChonBlock与5% BSA-0.05% Tween 20对背景干扰的的封闭效果对比

Western blot中的背景噪音（BG noise）主要由抗体与硝酸纤维素膜的非特异性疏水结合引起。为评估ChonBlock与传统封闭缓冲液（BSA-Tween）的性能差异，本研究将硝酸纤维素膜碎片分别用ChonBlock或BSA-Tween缓冲液封闭后置于ELISA板中，与一抗及二抗反应，并通过TMB显色（ELISA法）后用酶标仪定量测定各孔OD值。如图所示，背景噪音的OD值与抗体浓度呈正相关（图a & b），且二者协同作用会进一步放大信号干扰（图c）。实验证明，ChonBlock封闭液对背景噪音的抑制效果优于BSA封闭体系。

产品订购：

注：请根据实验体系选择PBS或TBS配方的ChonBlock。

更多产品详情，请垂询Chondrex中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。